導(dǎo)致原子吸收光度計(jì)測量變量的因素分析
點(diǎn)擊次數(shù):1966 更新時間:2020-01-17
原子吸收光度計(jì)是應(yīng)用液體的表面張力特性,樣品體積只需要1ul,在偵測臺上,經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速、微量,高濃度,免石英管,免毛細(xì)管等耗材偵測吸收值的優(yōu)點(diǎn)。
原子吸收光度計(jì)可提供200~850nm的全光譜偵測,且不需要暖機(jī),開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array偵測器,偵測吸收值可高達(dá)300Abs(dsDNA濃度2~15000ng/ul),大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可偵測。
原子吸收光度計(jì)分析中影響測量條件的可變因素多,在測量同種樣品的各種測量條件不同時,對測定結(jié)果的準(zhǔn)確度和靈敏度影響很大。選擇合適的工作條件,能有效地消除干擾因素,可得到好的測量結(jié)果和靈敏度。
1、吸收波長(分析線)的選擇:通常選用共振吸收線為分析線,測量高含量元素時,可選用靈敏度較低的非共振線為分析線。如測Zn時常選用靈敏的213.9nm波長,但當(dāng)Zn的含量高時,為保證工作曲線的線性范圍,可改用次靈敏線307.5nm波長進(jìn)行測量。As,Se等共振吸收線位于200nm以下的遠(yuǎn)紫外區(qū),火焰組分對其明顯吸收,故用火焰原子吸收法測定這些元素時,不宜選用共振吸收線為分析線。測Hg時由于共振線184.9nm會被空氣強(qiáng)烈吸收,只能改用此靈敏線253.7nm測定。
2、光路準(zhǔn)直在分析之前,必須調(diào)整空心陰極燈光的發(fā)射與檢測器的接受位置,保證提供盡可能大的測量能量。
3、狹縫寬度的選擇狹縫寬度影響光譜通帶寬度與檢測器接受的能量。調(diào)節(jié)不同的狹縫寬度,測定吸光度隨狹縫寬度而變化,當(dāng)有其它譜線或非吸收光進(jìn)入光譜通帶時,吸光度將立即減少。不引起吸光度減少的狹縫寬度,即為應(yīng)選取得適合狹縫寬度。對于譜線簡單的元素,如堿金屬、堿土金屬可采用較寬的狹縫以減少燈電流和光電倍增管高壓來提高信噪比,增加穩(wěn)定性。對譜線復(fù)雜的元素如鐵、鈷、鎳等,需選擇較小的狹縫,防止非吸收線進(jìn)入檢測器,來提高靈敏度,改善標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系。